The Dark Room (pol. Mroczny Pokój, Pokój Cienia) to jedno z finałowych pomieszczeń oprócz Skrzyni. Zostaje ono odblokowane po pokonaniu Szatana 5 razy, podobnie jak The Negative. Można się tam dostać tylko z Negatywem przez skrzynię pojawiającą się po zabiciu Diabła. Podobnie jak w The Chest, w pomieszczeniu startowym znajdują się duże, złote drzwi możliwe przez zebranie Odłamków Klucza lub użycie Dad's Key. Po ich otwarciu możemy zmierzyć się z prawdziwym ostatecznym bossem. Jednak zamiast złotych skrzyń w pomieszczeniu startowym znajdują się czerwone.
- Warto wspomnieć, że jeśli w The Dark Room pojawi się dowolna kamienna/złota/żelazna skrzynia, jej dropem będzie losowy przedmiot.
Podobnie do Sheol, The Dark Room zawiera tylko jeden poziom. Okoliczne pokoje są wypełnione bossami oraz mini-bossami spotykanymi na poprzednich poziomach. Na jego końcu zawsze znajduje się The Lamb.
Boss
| |
| The Lamb |
Muzyka
Podczas pobytu w The Dark Room możemy usłyszeć utwór zwany Devoid. Jego nazwę możemy przetłumaczyć na "pozbawione czegoś", co informuje nas o pustce w duszy Isaac'a.
Galeria
 The Basement |  The Caves |  The Depths |  The Womb |  Sheol |  The Dark Room | |
 Cellar |  Catacombs |  Necropolis |  Utero |  The Cathedral |  The Chest | |
